中國GMP第一章 總則 第三條

本規(guī)范作為質量管理體系的一部分，是藥品生產管理和質量控制的基本要求，旨在最大限度地降低藥品生產過程中污染、交叉污染以及混淆、差錯等風險，確保持續(xù)穩(wěn)定地生產出符合預定用途和注冊要求的藥品。

中國藥典2015年版四部通則 <1106>

控制菌檢查法系用于在規(guī)定的試驗條件下，檢查供試品中是否存在特定的微生物。……供試品檢出控制菌或其他致病菌時，按一次檢出結果為準，不再復試。

中國藥典2015年版四部通則 <1107>

本限度標準所列的控制菌對于控制某些藥品的微生物質量可能并不全面，因此，對于原料、輔料及某些特定的制劑，根據(jù)原輔料及其制劑的特性和用途、制劑的生產工藝等因素，可能還需要檢查其他具有潛在危害的微生物。

其他具有潛在危害的微生物是什么？ 在超過藥典標準中控制菌范圍之外的微生物會有一個新的名稱:不可接受微生物（Objectionable Microorganisms）。

判斷某種微生物是否是不可接受微生物時需要結合不同的角度和標準進行評估，包括分離微生物的描述（準確鑒定、分析致病性、分析特性及常見來源等）、分離微生物的載荷、產品給藥途徑、產品特性、用藥人群等綜合分析。

圖1 不可接受微生物風險評估決策樹（來源：PDA）

圖2 與產品召回、非無菌制劑引起的感染及臨床感染相關的常見微生物種類（來源：PDA）
 

在FDA召回的非無菌產品中，洋蔥伯克霍爾德菌（B.cepacia）污染是涉及召回次數(shù)最多的微生物污染召回事件，在2004-2011年FDA召回事件中的不可接受微生物，占三分之一的污染微生物為洋蔥伯克霍爾德菌（Burkholderia cepacia）。

圖3 2004-2011年FDA召回事件中的不可接受微生物

   最開始，洋蔥伯克霍爾德菌并未被列入USP的控制菌檢查范圍內，它對藥品的潛在威脅性是在2018年9月底舉行的PDA/FDA會議中被提出。目前，USP<60> MICROBIOLOGICAL EXAMINATION OF NONSTERILE PRODUCTS—TESTS FOR BURKHOLDERIA CEPACIA COMPLEX已于2019年12月1日生效，正式將洋蔥伯克霍爾德復合體納入了USP控制菌檢查項目。
 

 

洋蔥伯克霍爾德菌

   洋蔥伯克霍爾德菌群（Burkholderia cepacia complex , BCC ），是一類隸屬于β-變形菌綱，伯克霍爾德菌目，伯克霍爾德菌科，伯克霍爾德菌屬的，表型近似，基因存在差異，環(huán)境中普遍的革蘭氏陰性菌的總稱 。

洋蔥伯克霍爾德菌是自然界中分離獲得該菌群最常見代表菌株之一。

特點：革蘭氏陰性桿菌；代謝譜廣，對嚴苛環(huán)境的適應能力強；自然環(huán)境及人類活動范圍中廣泛分布；可使動植物（包括人類）致病。

 

USP<60> 規(guī)定了使用TSB對樣品進行預培養(yǎng)，在BCSA培養(yǎng)基上劃線選擇性培養(yǎng)。洋蔥伯克霍爾德菌可能存在的指示特征為周圍黃色的綠棕色菌落，或者周圍粉紅色的白色菌落。挑選可疑菌進行鑒定。

關于BCSA瓊脂培養(yǎng)基

培養(yǎng)基原理：酪胨和酵母提取物提供豐富的氮源，乳糖和蔗糖提供兩種碳源，酚紅指示劑，結晶紫、萬古霉素抑制革蘭氏陽性菌的生長，慶大霉素抑制部分革蘭氏陰性菌的生長，多粘菌素B可抑制銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯菌、鮑曼不動桿菌等菌的生長。

目前，北京三藥針對洋蔥伯克霍爾德菌的檢驗開發(fā)了兩種培養(yǎng)基，洋蔥伯克霍爾德菌選擇性瓊脂基礎（符合USP）和BCC培養(yǎng)基基礎以及對應的配套試劑，歡迎各位老師咨詢交流。